Fonctionnement des lames gélosées

Les tests avec lames gélosées sont destinés aux qualiticiens disposant d'un minimum de connaissances microbiologiques.

La température d'incubation est à 37 °C pour les tests Flore totale / Coliformes. Attention, la température est à 25 °C pour les tests Levures moisissures.

La lecture est différente entre application HACCP et RABC (Risk Analysis and Biocontamination Control = Analyse des risques et contrôle de la biocontamination).

• Dévisser et extraire la lame du récipient cylindrique sans toucher les surfaces des milieux de culture

• Échantillonnage Surfaces : plier la lame en tenant le couvercle en formant un angle de 90° et appliquer pendant 10 secondes la lame contre la surface à examiner

• Échantillonnage Liquides : en tenant la lame par le bouchon, le tremper dans l’échantillon qui vient d’être prélevée de manière à ce que les surfaces des milieux de culture soient complètement immergées. Laisser égoutter l’excès de liquide de la lame et tamponner les dernières gouttes sur un papier absorbant

• N'oubliez pas de désinfecter le plan de travail testé pour éviter de créer un milieu de culture s'il reste de la gélosé

• Réintroduire le lame dans le récipient et refermer en vissant et incuber à 37 °C ± 1°C pendant 24 à 48h. Pour la détection des levures, incuber 48h à 25°C.

• Après l’incubation, examiner la croissance des bactéries sur le milieu et estimez la concentration bactérienne.

Interprétation des lames gélosées après application sur une surface de travail (par comptage des UFC)  : Comptez le nombre total d'unités formant colonies pour obtenir le nombre total de bactéries.

Conseil de stockage : Le stockage doit se faire entre 10° C à 20° C jusqu’à la date de péremption. Ne jamais stocker en dessous de 5° C ou au-dessus de 25° C pour éviter le décollement de la gélose.

La lame gélosée peut être jetée comme un déchet classique après autoclavage ou immersion dans un liquide désinfectant.

.Découvrez comment procéder à l'aide de cette vidéo : 

L'ATPmétrie : 

• permet de connaître rapidement en quelques minutes le niveau de contamination d’une surface en utilisant l’ATP Métrie Qualitative mais ne donne pas un résultat précis de mémoire. Pour cela, il existe l’ATPmétrie quantitative plus précise.
• est facile à mettre en œuvre.
• ne permet pas de caractériser  les germes présents (détecte tous les germes ) mais ne permet pas de  savoir quels types de  germes sont présents.
  
• ne nécessité pas d'étuve d'incubation.

Les bilames gélosées : 

• ne permettent de voir le résultat qu'au bout de 24h minimum après incubation à 37 °C.
• nécessitent un incubateur.
• permettent de caractériser les germes présents selon le type de lames utilisées avec des milieux de cultures sélectifs.
• ont un résultat précis, on peut avoir un nombre d’UFC (unités) de chaque type de germes /lame.

Tout dépend de la finalité du contrôle, il peut être intéressant de combiner les deux tests pour la validation du nettoyage pour détection de flore totale, entérobactérie et coliformes. 

L'ATP métrie est utilisé en industrie agroalimentaire car c'est une méthode rapide de contrôle de l'efficacité du nettoyage et il permet la remise en production très vite si le matériel ou la surface doivent être régulièrement réutilisés.

 Les lames gélosées sont quant à elles souvent utilisées dans les établissements d'hôtellerie et de restauration.